Rett综合征(RTT)是一种严重的神经发育障碍疾病，以神经功能障碍和寿命缩短为特征，主要发生在女性患者中，涉及MECP2基因的功能缺失突变。

早期研究表明用腺相关病毒血清型9 (AAV9)通过静脉注射重新引入野生型MECP2可以延长小鼠寿命。然而静脉给药AAV9-MECP2会在WT小鼠体内产生致死性肝毒性，由此引发的安全问题，也给AAV基因疗法蒙上了阴影。

2022年11月14日，来自中国科学院神经科学研究所的科学家在Neuroscience Bulletin 杂志发表题为“Extension of the Lifespan of a Mouse Model of Rett Syndrome by Intracerebroventricular Delivery of MECP2”的文章，该文章发现通过侧脑室注射AAV9-MECP2可以显着延长MECP2突变小鼠的寿命，同时体重减轻、运动评分异常和步态评分异常等病理特征也发生了好转。

为了产生Mecp2基因完全敲除(KO)而无嵌合的Mecp2-/y小鼠，研究人员将spCas9 mRNA和4个sgRNAs注入受精卵的细胞质中，发现了一个突变的Mecp2等位基因，其外显子缺失了4个bp，这导致了Mecp2基因的移码以及大脑中Mecp2蛋白的沉默。

与雄性WT小鼠相比，Mecp2突变小鼠的寿命明显缩短，中位生存期为43.2天。奇怪的是本研究的Mecp2-突变小鼠的中位生存期比其他报道短(约60 ~ 70天)，这可能与母系Mecp2-/+小鼠育儿能力受损有关。

注射AAV一个月后，发现与注射对照AAV9载体的雄性WT小鼠相比，AAV9- hsyn -MECP2小鼠MECP2归一化蛋白水平增加了41.3%±7.8%， AAV9-cag-MECP2小鼠MECP2归一化蛋白水平增加了38.9%±6.9%，重要的是AAV9-hSyn-MECP2和aav9-cac-Mecp2均显着延长了Mecp2突变小鼠的寿命。

为了评估MECP2突变小鼠神经元中的MECP2转导效率，研究人员对MECP2和NeuN进行了免疫荧光染色，结果表明在整个大脑的神经元中，包括皮层、海马和下丘脑，MECP2的蛋白质水平被部分挽救。然而大脑各区域的转导效率不同，效率最高的是下丘脑，而效率最低的是海马区。

总而言之，该研究基于CRISPR/Cas9技术构建了Mecp2突变模型，发现AAV9-CAG-MECP2诱导MECP2广泛、持久的恢复，可以显着延长MECP2突变小鼠的寿命，并逆转体重减轻、运动评分异常和步态评分异常等病理特征，为基因疗法治疗RTT提供了一个潜在的策略。

原始出处：

Yang， K.， Cheng， C.， Yuan， Y. et al. Extension of the Lifespan of a Mouse Model of Rett Syndrome by Intracerebroventricular Delivery of MECP2. Neurosci. Bull. (2022). https：//doi.org/10.1007/s12264-022-00974-y.