炎症性疼痛是一种普遍的慢性疾病，其发病常与负面情绪状态，特别是抑郁与焦虑紧密相关。此类疼痛若长期存在，将严重侵蚀患者的健康状况及生活质量，进一步诱发焦虑、抑郁等消极心理状态。在治疗领域，非甾体抗炎药虽常被作为治疗炎症性疼痛的首选方案，但其针对持续性炎症性疼痛的疗效却相对有限。此外，鉴于其潜在的不良反应风险，长期应用此类药物并不被推荐。因此，积极探索并开发一种积极、高效且安全的炎症性疼痛治疗策略，特别是在慢性病程阶段，显得尤为重要且迫切。

瘀血痹片（YXB）是由乳香、没药、红花、威灵仙、川牛膝、香附、姜黄、当归、丹参、川芎与黄芪等组成的中药复方，专用于治疗因瘀血阻络所导致的痹症。其中，威灵仙与香附在药理学研究中，被证实具有突出的抗炎效果。同时，在镇痛效果方面，YXB也展现出了不凡的实力，为疼痛管理提供了新的治疗途径。

近日，一篇发表在《Chinese Medicine》杂志，名为“The analgesic efects of Yu-Xue-Bi tablet (YXB) on mice with infammatory pain by regulating LXA4-FPR2-TRPA1 pathway”的文章揭示了YXB的抗炎镇痛作用。

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YXB可减轻CFA小鼠的炎症性疼痛、热超敏反应、抑郁和焦虑行为

该研究不仅深入评估了YXB的镇痛效能，还特别聚焦于其对CFA模型小鼠抑郁与焦虑行为模式的潜在影响（图2A）。针对镇痛效果的分析，研究者运用了标准化的冯-弗雷测试及热板实验，通过对比各组小鼠在模型建立前、模型建立后以及治疗第19天的50%缩足阈值（PWT）与缩足潜伏期（PWL）数据，进行了系统性评估。结果显示，在模型建立前，各组小鼠的PWT与PWL数值无统计学显著差异；然而，在模型建立后的第1天，Sham组小鼠的PWT与PWL值显著高于其他各组。进一步地，治疗第19天结果显示，相较于Sham组，CFA组小鼠的PWT与PWL均呈现出显著降低的趋势；而与CFA组相比，YXB组小鼠的PWT与PWL则显著回升，同时，IBU组小鼠的PWL也呈现出显著升高的态势（图2B）。

为了探究YXB对小鼠抑郁与焦虑行为的具体影响，研究采用了矿场实验与悬尾试验（TST）作为评估工具。在矿场实验中，通过记录小鼠在5分钟内的总行走距离及穿越中心区域的时间来量化其焦虑水平，其中，总距离与穿越时间的缩短被视为焦虑症状加剧的标志。而在TST中，则以小鼠的静止时间来衡量其抑郁程度，静止时间的延长表明抑郁症状更为严重。结果显示，相较于Sham组，CFA组小鼠的穿越时间显著缩短，静止时间则显著延长；而与CFA组相比，YXB组小鼠的穿越时间显著增加（图2C），静止时间则明显减少（图2D）。综上所述，YXB在缓解CFA模型小鼠的炎症性疼痛、热超敏反应、抑郁及焦虑行为方面的积极作用。

图2 YXB可减轻CFA小鼠的机械性疼痛、热超敏反应、抑郁和焦虑行为

YXB促进CFA小鼠外周炎症消退并抑制外周致敏

炎症消退的主要特征为炎症细胞的适度清除。巨噬细胞作为关键炎症细胞，在炎性疼痛中扮演重要角色，其标志物包括CD68、F4/80+CD11b+。该研究通过免疫荧光法及流式细胞术，分别检测了小鼠爪及损伤感知神经元细胞（DRG）中CD68及F4/80+CD11b+的表达水平。结果显示，与Sham组相比，CFA组小鼠爪及DRG中CD68与F4/80+CD11b+的表达显著上升（图3B、C、E、F）。然而，经YXB处理后，CFA小鼠爪部CD68及F4/80+CD11b+的表达显著降低（图3B、C、E），同时DRG中CD68的表达也明显下降（图3F）。这提示，YXB能有效抑制CFA小鼠外周血中巨噬细胞的浸润，从而促进炎症的消退。

此外，炎症性疼痛的主要病理机制涉及外周致敏，而TRPs作为非选择性阳离子通道，参与这一过程。组织损伤后释放的炎症介质可激活TRP通道，导致外周致敏并引发疼痛。研究采用免疫荧光法检测了TRPA1与TRPV1在爪及DRG中的表达情况。结果显示，CFA组小鼠足部TRPA1表达较空白对照组显著升高，而TRPV1表达无显著差异。与CFA组相比，YXB-H组小鼠爪部TRPA1表达显著降低，但TRPV1表达未受影响（图3B-D）。另一方面，CFA组小鼠DRG中TRPV1表达较Sham组显著上升，而TRPA1表达则无显著差异。经YXB处理后，CFA小鼠DRG中TRPV1表达显著降低，但TRPA1表达未见明显变化（图3B、C）。上述结果表明，YXB通过下调DRG中TRPV1及爪部TRPA1的表达，有效抑制了外周致敏过程。

图3 YXB促进CFA小鼠外周炎症消退并抑制外周致敏

FPR2拮抗剂可减弱YXB的抗炎和镇痛作用

促炎症消退介质具有抑制TRPA1或TRPV1表达的能力，从而有效缓解疼痛。具体而言，LXA4主要作用于FPR2，进而降低TRPA1的表达水平。该研究揭示了YXB能够提升LXA4的浓度，并伴随TRPA1表达的减少。为深入探究这一机制及其对YXB镇痛和抗炎效果的影响，研究在CFA小鼠接受YXB治疗的第17至19天期间，引入了FPR2拮抗剂WRW4（图4A）。

通过评估小鼠的PWT（机械缩足阈值）以及L5脊髓背角中降钙素基因相关肽（CGRP）的表达情况，来量化YXB的镇痛效果。结果显示，治疗第19天，与CFA组相比，YXB组小鼠的PWT显著提升（图4B），同时L5脊髓背角中的CGRP表达显著降低（图4C），且爪部TRPA1与CD68的表达亦显著下降（图4D、E）。然而，当与YXB组进行比较时，YXB-WRW4组小鼠的PWT明显下降（图4B），且L5脊髓背角中的CGRP表达显著增加（图4C）。结果表明，FPR2拮抗剂可能削弱YXB的镇痛和抗炎效能，从而间接验证了YXB通过“LXA4-FPR2-TRPA1”这一途径发挥其镇痛作用。

图4 FPR2拮抗剂可减弱YXB的镇痛和促解作用

YXB对AITC引起的疼痛的影响有限

为验证YXB通过LXA4途径对TRPA1的调节作用，该研究利用已知的TRPA1激动剂异硫氰酸烯丙酯（AITC）诱导疼痛反应，进而评估YXB的镇痛效能。结果显示，相较于Sham组，AITC处理组小鼠的PWT显著降低（图5B），同时L5脊髓背角CGRP的表达水平显著增加（图5C），并且爪子部位TRPA1与CD68的表达也显著上升（图5D、E）。

相反地，当小鼠在AITC暴露前接受YXB治疗时，与AITC单独处理组相比，其L5脊髓背角的PWT（图5B）及CGRP表达（图5C）均未观察到显著差异，爪子中TRPA1与CD68的表达也未发现显著变化（图5D、E）。这表明，YXB对AITC诱导的疼痛模型所产生的影响较为有限，从而暗示TRPA1可能是YXB调控的下游靶点之一。

图5 YXB对AITC引起的疼痛的影响有限

结论

总之，YXB具备显著调节CFA处理小鼠爪子中促炎症消退介质水平的能力，进而有效促进炎症的消退过程。该项研究阐明了YXB促进炎症消退的具体机制，为YXB在针对慢性炎症性疼痛及其相关疾病的临床应用提供了坚实的实验基础与科学依据。

参考文献：

Liu Y, Zhang G, Zhu C, Yao X, Wang W, Shen L, Wang H, Lin N. The analgesic effects of Yu-Xue-Bi tablet (YXB) on mice with inflammatory pain by regulating LXA4-FPR2-TRPA1 pathway. Chin Med. 2024 Aug 6;19(1):104. doi: 10.1186/s13020-024-00975-1